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IHC實驗指南(一)

 二維碼
發表時間:2018-10-10 15:18作者:武漢新啟迪Xinqidi來源:http://www.0458155.buzz

IHC實驗指南


石蠟包埋組織的免疫組織化學方案


解決方案和試劑

二甲苯

乙醇,無水變性,組織學等級(100%,95%,70%)

洗滌緩沖液:

TBST洗滌緩沖液:1XTBS / 0.1%Tween-20

為制備10X TBS的儲備溶液:將24.2g Trizma堿和80g氯化鈉加入1L dH2O中。將pH調節至7.6。

工作溶液:1XTBST / 0.1%吐溫-20:將100ml 10XTBS加入900ml dH2O中。加入1 ml Tween-20并充分混合。

蒸餾水(dH2O)

抗原檢索解決方案:

0.01M檸檬酸鈉緩沖液,pH6.0

制備儲備溶液:溶液A. 0.1M檸檬酸溶液:將21.0g檸檬酸,一水合物(C 6 H 8 O 7·H 2 O)溶解在100ml dH 2 O中。溶液B. 0.1M檸檬酸鈉溶液:將29.4g檸檬酸三鈉二水合物(C 6 H 5 Na 3 O 7·2H 2 O)溶于100ml dH 2 O中。

工作溶液:將9ml儲備溶液A和41ml儲備溶液B加入450ml dH2O中。將pH調節至6.0。

3%Hydrogene Peroxide

阻止緩沖區:

1xPBS:通過將8g NaCl,0.2g KCl,1.44g Na 2 HPO 4和0.24g KH 2 PO 4溶解在800ml蒸餾水中制備該緩沖液。然后用HCl調節pH至7.4,并加入H2O至1升。加入10%血清制成最終的封閉緩沖液(血清來源取決于二抗的宿主)


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